Jak długo pacjenci z białaczką w remisji klinicznej nie mają komórek białaczkowych, nie wiadomo, ani nie wiadomo, czy rzadkie resztkowe komórki białaczkowe są zdolne do spowodowania nawrotu choroby. Do niedawna metody wykrywania minimalnej pozostałościowej białaczki nie były wystarczająco czułe, aby wykryć komórki białaczkowe stanowiące mniej niż 2 do 5 procent jednojądrzastych komórek szpiku kostnego i nie były wystarczająco specyficzne, aby ustalić, czy resztkowe blaszki były w rzeczywistości pochodzenia białaczkowego. 2 Identyfikacja i charakterystyka niekandomowych translokacji chromosomowych na poziomie molekularnym 3 4 5 6 i zastosowanie reakcji łańcuchowej polimerazy 7, 8 w celu powielenia specyficznych zmian chłoniaka lub białaczki w DNA lub RNA9 10 11 12 13 14 zwiększyły czułość. z którym resztkowa choroba może być wykryta przez trzy lub cztery rzędy wielkości. Jednak translokacje chromosomalne specyficzne dla białaczki są molekularnie scharakteryzowane tylko u mniejszości pacjentów, co ogranicza możliwość zastosowania tego podejścia. Podczas różnicowania limfocytów B i T, rearanżacja immunoglobuliny i loci receptora limfocytu T generuje unikalne sekwencje DNA; w limfocytach B, na przykład, proces wytwarza hiperzmienną sekwencję znaną jako region III determinujący komplementarność (CDRIII) łańcucha ciężkiego immunoglobuliny. Ponieważ ostra białaczka limfoblastyczna (ALL) wynika z klonalnej ekspansji złośliwych limfocytów B lub T, 16, 18 te rearanżacje mogą być wykorzystane jako specyficzne markery klonu białaczkowego. W konsekwencji, kilku badaczy opracowało metody wykorzystujące reakcję łańcuchową polimerazy do wykrywania resztkowych złośliwych klonów komórek T i linii komórek B w białaczkach limfoblastycznych.19 20 21
Niedawno opisaliśmy szybką metodę oznaczania sekwencji CDRIII komórek białaczkowych u pacjentów z linią B ALL.21 W metodzie reakcji łańcuchowej polimerazy CDRIII, reakcja łańcuchowa polimerazy amplifikuje unikalne sekwencje CDRIII komórek białaczkowych za pomocą starterów homologicznych do sekwencji konsensusowych w zmiennych (VH) i łączących (JH) segmentach, które otaczają interweniujący segment różnorodności (D) w rearanżowanym locus immunoglobuliny ciężkiego łańcucha. Specyficzne dla białaczki fragmenty CDRIII zamplifikowane przez łańcuchową reakcję polimerazy są sekwencjonowane i wykorzystywane do generowania diagnostycznych sond oligonukleotydowych, które nie krzyżują się hybrydyzująco z sekwencjami CDRIII normalnych limfocytów B.
Korzystając z tej techniki, zbadaliśmy zakres minimalnej białaczki resztkowej w grupie ośmiu pacjentów z linii B ALL, dla których próbki szpiku były dostępne po ich wejściu w kliniczną remisję.
Metody
Próbki kliniczne i analiza DNA
Tabela 1. Tabela 1. Dane kliniczne i laboratoryjne pacjentów z ostrą białaczką limfoblastyczną z linii B. w diagnostyce. Próbki szpiku kostnego od ośmiu pacjentów z linii B ALL uzyskano w momencie rozpoznania i podczas chemioterapii (i od dwóch z nich po zakończeniu leczenia). Zgoda na wykorzystanie tych okazów do badań została udzielona przez pacjentów lub ich rodziców oraz przez Komitet ds. Ochrony Ludzi w Szpitalu Dziecięcym w Filadelfii
[przypisy: ropomocz, hipoglikemia noworodka, trombocytoza ]
Comments are closed.
Article marked with the noticed of: tanie sushi warszawa[…]
Tętniak mózgu objawy niepozorne
Article marked with the noticed of: masaż relaksacyjny warszawa[…]
Ostatnio nabawiłam się kontuzji podczas rozciągania
[..] Blog oznaczyl uzycie nastepujacego fragmentu skuteczne odchudzanie[…]
u mnie pojawił się ból biodra