Dysfunkcja aktywacji białka śródbłonka C w ciężkiej sepsie meningokokowej czesc 4

Aktywny aktywowany test białka C. Antygen trombomoduliny i kompleksy trombina-antytrombina zostały wykryte przy użyciu zestawu immunoenzymatycznego (ELISA) połączonego z trombomoduliną (Immubind [nr 837], American Diagnostica) i zestawu ELISA kompleksu TAT (Enzygnost, Dade Behring). Endotelialny receptor białka C, białko C, białko S i antygeny antytrombiny mierzono za pomocą testu ELISA.35-38. Aktywowane białko C w osoczu mierzono za pomocą zmodyfikowanego testu wychwytu enzymu.39 Dolna granica wykrywalności wynosiła 3 ng na mililitr. Szczegóły tej metody znajdują się w Dodatku 2 (dostępnym wraz z pełnym tekstem tego artykułu na http://www.nejm.org). Analiza statystyczna
Dane są wyrażone jako mediana, średnie i zakresy. Porównania pomiędzy pacjentami i kontrolami przeprowadzono z użyciem sparowanych testów t-for z danymi przekształconymi logarytmicznie.
Wyniki
Ustalenia histologiczne i ultrastrukturalne
Rycina 2. Rycina 2. Próbka skóry z biopsji u pacjenta z posocznicą meningokokową. Próbka biopsji ze zmian plamistych pokazuje obszary zawierające naczynia zakrzepowe (strzałka po prawej stronie w panelu A i strzałka w panelu B) i naciek okołonaczyniowy (strzałka po lewej stronie w panelu A) (hematoksylina i eozyna, × 100 [panel A] i × 400 [Panel B]). Panel C pokazuje komórki zapalne (strzałka) wokół niechronionych naczyń (hematoksylina i eozyna, x 400). Naciek komórkowy składał się zarówno z neutrofili (zidentyfikowanych przez wybarwianie elastydem neutrofilowym), jak i monocytów i makrofagów (zidentyfikowanych przez wybarwienie CD68).
Ryc. 3. Ryc. 3. Transmisyjne mikroskopia elektronowe próbek skórno-biopsyjnych od pacjentów z meningokokową sepsą. Śródbłonek jest nienaruszony (strzałki) zarówno w naczyniu z zakrzepem (panel A, x 1300), jak i w naczyniu z nienasierowanym naczyniem (panel B, x 2200). Czarne obszary są artefaktami wynikającymi z przetwarzania małych i delikatnych okazów.
We wszystkich próbkach z biopsji ogólna struktura tkanki była dobrze zachowana; istniały dowody zakrzepicy i często okołonaczyniowego, ostrego nacieku komórek zapalnych neutrofili i monocytów (ryc. 2). Zakrzepica została sklasyfikowana jako ciężka u 5 z 21 pacjentów, umiarkowana u 9, łagodna u 4 i nieobecna u 3. Uznanie zapalenia oceniono jako ciężkie u 6 z tych 21 pacjentów, umiarkowane u 12 i łagodne u 3. Nasilenie przebarwień w przypadku markerów komórek śródbłonka CD31 i CD34 w próbkach biopsyjnych od pacjentów z posocznicą meningokokową były na ogół równoważne z tymi obserwowanymi w próbkach skóry kontrolnej, ale niekiedy obserwowano nieciągłe barwienie zarówno w naczyniach zakrzepowych, jak i nie zakrzepłych. Transmisyjna mikroskopia elektronowa próbek pobranych z biopsji skóry od pięciorga dzieci z plamami purpurowymi ujawniła, że chociaż niektóre naczynia (zarówno z tymi, jak i bez zakrzepicy) wykazywały utratę komórek śródbłonka z charakterystycznym brakiem organelli, to odkrycie nie było szeroko rozpowszechnione. Integralność komórek śródbłonka była ogólnie zachowana zarówno w naczyniach z zakrzepem, jak i bez zakrzepów (Figura 3).
Trombomodulina i ekspresja receptora białka śródbłonka C na śródbłonku
Figura 4. Figura 4. Próbki z biopsji skóry inkubowane z monoklonalnym przeciwciałem przeciwko trombomodulinie (barwienie immunoperoksydazą)
[przypisy: gastrolog garwolin, pou u laryngologa, autologiczny przeszczep komórek macierzystych ]
[więcej w: insuflacja żołądka, insuflacja żołądka wikipedia, szczepionka podjednostkowa ]