Amplifikacja CDRIII przez łańcuchową reakcję polimerazy, z kwantyfikacją biblioteki fagowej, jak opisano tutaj, może wykryć komórkę białaczkową wśród 100 000 normalnych komórek, kolejność czułości 2 do 3 logów wyższą niż inne metody. Chociaż technika reakcji łańcuchowej polimerazy CDRIII wciąż jest technicznie wymagająca, może być odpowiednia dla kooperatywnego laboratorium referencyjnego grupy. Może być stosowany na przechowywane, zamrożone próbki i ma zastosowanie do krwi obwodowej, płynu mózgowo-rdzeniowego i aspiratów szpiku kostnego. Prospektywna próba z udziałem dużej liczby pacjentów, choć wymagałaby dużego personelu, jest technicznie możliwa.
Metoda reakcji łańcuchowej polimerazy CDRIII jest najbardziej realistyczna w przypadku linii B ALL z jedną lub dwiema stabilnymi przegrupowaniami łańcucha ciężkiego, które na szczęście wydają się być większością. Z tego powodu badaliśmy tylko pacjentów, których białaczka, na podstawie analizy Southern blot, miała tylko jedno lub dwa uporządkowane pasma. Niemniej jednak, u pacjentów C138, C135 i C52, metoda reakcji łańcuchowej polimerazy CDRIII wykryła szereg sekwencji CDRIII, których nie można wyjaśnić przez proste rearanżacje obu allelów łańcucha ciężkiego w pojedynczym klonie limfoblastów. W przypadku pacjenta C138 klony C138-105 i C138-111 mogły powstać w wyniku sekwencyjnych rearanżacji VH, jak opisano w mysich rakach Blineage43, 44 i zostały powiązane z dwoma reorganizacjami wielu ciężkich łańcuchów immunoglobulin w jednym przypadku. ALL.45 W Patencie C135, Southern blotting próbki diagnostycznej wykazał jeden przestawiony prążek. Jednak metoda reakcji łańcuchowej polimerazy CDRIII ujawniła jedną dominującą sekwencję i dwie mniejsze sekwencje, które stanowiły 10 procent próbki. Pomniejsze sekwencje różniły się dwupunktowymi mutacjami i dodatkową parą zasad w regionie 3 genu VH. Mogą one reprezentować przykłady mutacji somatycznych, zjawisko występujące w chłoniaku z komórek B46, ale nie udowodniono, że występuje w ALL.45
Drugim nieoczekiwanym odkryciem było to, że sondy swoiste dla białaczki hybrydyzowały tylko z 57 do 91 procent płytek fagowych zawierających sekwencje CDRIII, zamiast więcej niż 95 procent, jak oczekiwano biorąc pod uwagę odsetek blastów w próbkach pobranych podczas diagnozy. Możliwe, że zamplifikowane sekwencje CDRIII, które nie hybrydyzowały z sondami specyficznymi dla białaczki, były sekwencjami CDRIII normalnych komórek B. Alternatywnie, mogą one reprezentować ograniczoną liczbę różnych sekwencji pochodzących z rearanżacji wielu ciężkich łańcuchów immunoglobulin w obrębie populacji białaczkowej, 45 lub zmutowanego potomstwa dominującej sekwencji CDRIII.
Zdecydowanie najbardziej prowokującym odkryciem było wykrycie i oznaczenie ilościowej białaczki resztkowej przez okres do 18 miesięcy po uzyskaniu klinicznej remisji i braku jej wykrycia w momencie przerwania terapii. Jedyne dziecko, u którego po zakończeniu terapii wystąpił nawrót pozawałowy, nie miało choroby szpiku kostnego, co sugeruje, że rzeczywiście centralny układ nerwowy był sanktuarium i że nie usunął jeszcze szpiku
[przypisy: szczepionka podjednostkowa, endokrynolog kielce nfz, angiolog legnica ]
Comments are closed.
wielu Polaków decyduje się wyjechać do Czech na operację zaćmy
[..] Blog oznaczyl uzycie nastepujacego fragmentu choroba meniera[…]
mononukleoza